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β-gal 報告基因染色試劑盒

更新日期:2023-12-14

訪(fǎng)問(wèn)量:2194

廠(chǎng)商性質(zhì):生產(chǎn)廠(chǎng)家

所在城市:上海市

簡(jiǎn)要描述:
大腸桿菌中的LacZ基因編碼產(chǎn)物為β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal),β-gal較穩定,能抵抗蛋白酶的水解,并可催化其底物X-gal產(chǎn)生藍色產(chǎn)物,所以可以方便地檢測出LacZ基因的表達。因而,LacZ基因或β-gal常用來(lái)作為報告基因,檢測表達載體介導的基因轉移表達效率,此外,也常用于基因啟動(dòng)子活性的研究。
品牌其他品牌供貨周期現貨
應用領(lǐng)域醫療衛生,生物產(chǎn)業(yè)

 

我公司的β-半乳糖苷酶(β-gal)報告基因染色試劑盒利用X-gal作為底物,配合試劑盒內提供的其他試劑,可對固定后的細胞、組織冰凍切片中的β-gal進(jìn)行顯色,陽(yáng)性結果表現為藍色。

包裝清單:

產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱(chēng)規格
SJ1233

β-半乳糖苷酶(β-gal)

報告基因染色試劑盒

100ML
說(shuō)明書(shū)一份

保存條件:

-20℃保存,一年有效。其中X-Gal溶液需避光保存。

產(chǎn)品組成:

產(chǎn)品名稱(chēng)編號名稱(chēng)

β-半乳糖苷酶(β-gal)

報告基因染色試劑盒

SJ1233-A試劑A
SJ1233-B試劑B
SJ1233-C試劑C
SJ1233-D試劑D(X-gal)
SJ1233-E試劑E(10× PBS)

使用方法:

使用前先將10 × PBS用去離子水稀釋至1× PBS。

染色工作液需現配現用,配制方法如下:

名稱(chēng)用量
試劑(A)25 ul
試劑(B)25 ul
試劑(C)25 ul
試劑D(X-gal)125 ul
試劑E(1× PBS)2.3 ml
總量2.5 ml

1、細胞樣品染色

1)培養的貼壁細胞處理完成后,用4%的多聚甲醛固定10分鐘后,用PBS洗三次,每次5分鐘,去除多余的PBS;

2)加入適量的染色工作液,放入37℃溫箱孵育1-24小時(shí)(35mm培養皿或6孔板一般使用1.5-2.0ml/皿(孔),其他規格的培養皿或培養板可依據培養面積的大小適量增加或減少染色液的量);

3)在顯微鏡下觀(guān)察,當染成藍色的細胞顏色適中時(shí),去除染色液,用1× PBS洗三次。

4)加入適量1× PBS,鏡下觀(guān)察、拍照(染色后的標本可在4℃保存一周)

2、組織冰凍切片染色

1)組織冰凍切片先用去離水洗滌3次,每次5分鐘,去除OCT膠;

2)用PBS洗滌切片3次,吸除PBS;

3)滴加染色工作液;

4)37℃孵育1-24小時(shí),直至切片中的細胞的顏色變藍。孵育過(guò)程最好在溫盒中進(jìn)行,以防止染色液蒸發(fā)。

 

5)吸除染色工作液,用PBS洗滌切片3次,每次5分鐘。  

6)水性封片劑封片后,鏡下觀(guān)察。染色后的標本片在4℃可保存數天。

3、小組織塊染色

1)組織塊在4%的多聚甲醛固定液中充分固定后,用自來(lái)水沖洗盡量去除固定劑;

2)用PBS浸泡組織塊5-10分種;

3)將組織塊轉移至染色液中,37℃孵育1-24小時(shí)(染色液的用量盡量大于組織塊體積的10倍);

4)組織塊中出現藍色著(zhù)色后,去除染色液,PBS洗滌三次,每次5分種。

5)對組織進(jìn)行拍照,或將組織塊進(jìn)行冰凍切片后鏡下觀(guān)察。 

注意事項:

1、在石蠟包埋的過(guò)程中β-半乳糖苷酶可能失活,從而造成染色失敗,因此本試劑盒不建議用于石蠟切片的檢測。如果一定要用于石蠟切片的檢測,建議自行對實(shí)驗條件進(jìn)行一定的優(yōu)化。

2、染色時(shí)間較長(cháng)時(shí),請在溫盒中進(jìn)行,或是增加染色液的量,以防染色液蒸發(fā)變干。

   3、染色后應及時(shí)觀(guān)察、拍照。放置過(guò)久由于藍色產(chǎn)物的擴散,可能會(huì )出現部分假陽(yáng)性。

備注:

          產(chǎn)品信息可能會(huì )有優(yōu)化升級,請以實(shí)際標簽信息為準。

 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。

 

 為了您的安全和健康,請在實(shí)驗過(guò)程中做好防護工作。

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