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cck8細胞增殖檢測試劑盒的原理是什么?

更新時(shí)間:2023-10-13   點(diǎn)擊次數:1290次
  cck8細胞增殖檢測試劑盒是一種常用于評估細胞增殖和生存能力的試劑。它基于雙氮唑黃(WST-8)的化學(xué)反應原理。WST-8是一種水溶性二硫蘇糖鹽,當與電子傳遞介質(zhì)1-甲基四氫唑硫代甘汞(MTS)混合時(shí),可以通過(guò)細胞內還原酶的活性來(lái)檢測細胞數量。
 
  在cck8細胞增殖檢測試劑盒中,WST-8與MTS以及一種電子傳遞介質(zhì)PMS(鄰苯二酚硫酸鹽)混合。當此混合物加入到細胞培養體系中時(shí),細胞內的還原酶(如脫氫酶等)會(huì )將WST-8還原成形成橙色產(chǎn)物的可溶性熒光物。這個(gè)橙色產(chǎn)物的量與細胞數量成正比。
 
  在實(shí)驗中,將待測的細胞接種在培養皿或孔板中,并進(jìn)行不同處理組和對照組。接下來(lái),將CCK-8試劑加入每個(gè)孔中,并進(jìn)一步孵育一段時(shí)間,使細胞內的還原酶與試劑發(fā)生反應。在反應結束后,通過(guò)測量溶液中產(chǎn)生的橙色產(chǎn)物吸光度的變化,可以間接地評估細胞數量。
 

cck8細胞增殖檢測試劑盒

 

  使用吸光度檢測儀器,以450納米作為測試波長(cháng),測量樣品的吸光度值。吸光度值的增加與細胞數量的增加成正比。通常,吸光度值越高,說(shuō)明細胞數量越多,代表細胞增殖能力較強;相反,吸光度值較低則表示細胞數量較少,代表細胞增殖能力較弱。
 
  總結起來(lái),cck8細胞增殖檢測試劑盒利用細胞內的還原酶活性將WST-8還原成可溶性熒光物,通過(guò)測量熒光物的吸光度變化,間接評估細胞數量,從而達到評估細胞增殖和生存能力的目的。這種方法簡(jiǎn)便、快速,廣泛應用于細胞生物學(xué)和藥理學(xué)研究中。

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